 |
Chiron Corporation jest firmą farmaceutyczną o zasięgu ogólnoświatowym. Wprowadziła ona model działania dzięki któremu możliwe jest opracowywanie i dystrybucja nowoczesnych produktów wysokiej jakości. Celem strategicznym firmy są choroby nowotworowe oraz zakaźne. Długie i wnikliwe badania nad biologią chorób nowotworowych i zakaźnych, pozwalają na wytwarzanie produktów z substratów takich jak białka, małe molekuły i szczepionki. Firma dystrybuuje produkty przez trzy główne oddziały zajmujące się biofarmaceutykami, szczepionkami, oraz testowaniem krwi. |
Oddział zajmujący się krwią to Chiron Blood Testing, producent testu "Procleix HCV/HIV-1" opartego na technologii NAT (Nuclear Acid Testing), do wykrywania we krwi materiału genetycznego wirusów HCV i HIV-1 jednocześnie. Chiron Blood Testing w roku 2004 wprowadzi na rynek następcę testu "Procleix HCV/HIV-1", test "Procleix Ultrio" pozwalający na jednoczesne wykrywanie materiału genetycznego wirusów HCV, HBV i HIV-1.
Chiron Procleix TMA HIV-1/HCV
Metoda diagnostyczna pozwalająca na jednoczesne wykrycie w indywidualnej próbce lub puli osocza dwóch wirusów: HIV-1 i HCV.
Wykonanie testu obejmuje trzy kolejne etapy przeprowadzane w tej samej probówce:
I. "związanie" materiału genetycznego badanych wirusów,
II. namnożenie fragmentów genomu
III. wykrycie produktu namnożenia.
 |
I etap obejmuje lizę prowadzącą do uwolnienie materiału genetycznego wirusa. Następnie ulega on hybrydyzacji z sondami opłaszczonymi na drobinach magnesu. Niezwiązany materiał zostaje odpłukany, dzięki czemu także substancje będące potencjalnymi inhibitorami reakcji enzymatycznych znajdujące się w materiale badanym zostają usunięte ze środowiska reakcji.
II etap to amplifikacja fragmentów genomu badanych wirusów oparta na technologii TMA (transcription mediated amplification - amplifikacja przez odwrotną transkrypcję). W szeregu reakcji zachodzących w stałej temperaturze powstają biliony kopii fragmentu RNA wirusa.
Na III etapie wykrywane są namnożone wcześniej fragmenty RNA. Do detekcji wykorzystana jest hybrydyzacja zamplifikowanego RNA z sondami wyznakowanymi barwnikiem (Acridinium Ester). Gdy sonda nie hybrydyzuje barwnik ulega hydrolizie, co powoduje eliminację sygnału tła. Pomiar sygnału świetlnego emitowanego przez wyznakowaną sondę, zhybrydyzowaną z produktem amplifikacji odbywa się w chemiluminometrze. |
Zastosowanie trzech wyżej wymienionych technologii ma istotne zalety:
- uproszczenie procedury:
nie jest wymagane przygotowywanie próbek i ultrawirowanie w trakcie wykonywania procedury, wszystkie etapy (izolacja materiału genetycznego, namnożenie jego fragmentów oraz wykrywanie ostatecznego produktu amplifikacji) zachodzą w jednej probówce;
- wysoka wydajność oraz zminimalizowanie czasu wykonywania badania:
- w wersji półautomatycznej 1 osoba może wykonać do 200 badań w ciągu 5 godzin lub do 300 badań w 8 godzin,
- w wersji całkowicie zautomatyzowanej możliwe jest przebadanie do 500 próbek wciągu 8 godzin lub 1000 próbek
przez 12 godzin;
- jednoczesne wykrycie dwóch (trzech) wirusów;
- ograniczenie ryzyka wyniku fałszywie dodatniego:
badanie wykonywane jest w jednej probówce i nie wymaga przenoszenia mieszanin reakcyjnych, końcowym produktem
jest RNA - poza probówką mniej trwałe od DNA;
- kontrola prawidłowego przeprowadzenia badania na wszystkich etapach:
dla każdej próbki wykonywana jest oddzielna kontrola wewnętrzna (IC), nie wydłuża to jednak czasu trwania badania, gdyż IC jest wykonywane jednocześnie z właściwym badaniem;
- możliwość wykorzystania tego samego sprzętu do wykonywania innych testów opartych na technologii TMA (Chiron Procleix System):
Chiron Procleix HIV-1/HCV assay to I z rodziny testów diagnostycznych przeznaczonych do badania zakażeń wirusowych przenoszonych przez krew i jej produkty. Aktualnie opracowywane są:
- Chiron Procleix HIV-1/HCV/HBV assay (dostępne od październka 2002 r.),
- testy do wykrywania wirusów Parvo B19 oraz HAV.
Chiron Procleix HIV/HCV assay został dopuszczony przez Instytut Paula Ehrlicha (PEI - Niemcy), i FDA (USA) do badania zarówno pojedynczych donacji, jak i pul osocza i jest powszechnie wykorzystywany do badania wirusów HCV i HIV w stacjach krwiodawstwa w wielu krajach min: w USA, Francji, Niemczech, Hiszpanii, itd.
Wymagania sprzętowe:
- Automatyczna stacja pipetująca (TECAN RSP 150 + oprogramowanie Genesis),
- Myjnia (Chiron Procleix Target Capture System - TCS),
- Czytnik chemiluminescencji (Chiron Procleix HC+ Luminometer),
- Komputer z oprogramowaniem i osprzętem,
- Łaźnia wodna,
- Vortex.
|
do góry I
drukuj |